广州抗原免疫注意事项
1.纯度问题
作为抗原,其纯度越高,抗体的下游制备过程就越简单:对于多抗体,高免血清抗体分子越多,越容易获得低背景的抗体;对于单抗体制备,更容易筛选特异性抗体分泌细胞株。
2.抗原毒性问题
作为一种抗原物质,对动物体的毒性越小,毒性越大,动物容易死亡或状态不佳,难以产生高质量的抗体。为了制备蛇毒蛋白的单抗,研究人员使用体外细胞免疫法:脾脏B体外培养淋巴细胞。
3.抗原溶剂问题
抗原溶剂一般选用PBS它对生理盐水很友好,但在抗原制备和净化过程中不可避免地会引入一些去污剂【Triton,SDS或SKL(十二烷基肌氨酸钠)等Tris等等)。免疫前不去除这些物质,动物免疫后会死亡,免疫力会严重下降。低浓度尿素可溶于不溶性蛋白质(如包含体),因为动物能承受低浓度尿素。