广州培养基：细胞难伺候，你真的会选广州培养基吗？

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广州培养基：细胞难伺候，你真的会选广州培养基吗？

　　培养细胞的重要环节有很多，其中很重要的一步就是为细胞选择适合的生 长环境，为其选择成分适合又营养丰富的细胞培养基。细胞培养基是供给 细胞营养、维持细胞生长和增殖的多种营养物质的混合物，种类一般包括 经典/基础培养基、无血清培养基以及化学成分确定的培养基等。这其中又 以经典/基础培养基为常用。

　　经典/基础培养基属于合成培养基，是根据天然培养基的成分，用化学物质 模拟合成、人工设计、配制的培养基，其主要成分有氨基酸、碳水化合物 、无机盐、维生素及其他辅助成分，比如 DMEM、RPMI 1640、MEM、 DMEM/F12，这些都是应用非常广泛的经典/基础细胞培养基。

　　在确定培养基种类后，还会遇到培养基有不同分型的情况。那么对于经典 培养基中不同成分的作用及选择原则又是什么呢？

　　1

　　葡萄糖（Glucose）

　　作用：细胞生长所需的主要能量来源。

　　如何选择不同葡萄糖含量的培养基？

　　当初的 DMEM 中，葡萄糖浓度为 1 g/L，现在称其为低糖型 DMEM，适合培 养多数哺乳动物细胞；

　　高糖型 DMEM 中的葡萄糖浓度为 4.5 g/L，适合生长速度快，附着性较差 的肿瘤细胞；

　　使用无糖培养基的主要目的是，通过控制细胞的能量来源，研究细胞的代 谢过程或葡萄糖利用效率。

　　2

　　HEPES

　　作用：pH 缓冲剂。

　　是一种氢离子缓冲剂，其作用不依赖于 CO2；

　　在一定范围内对细胞无毒性作用，能较长时间控制恒定的 pH 范围，保证 细胞良好生长；

　　部分细胞对酸碱度的变化非常敏感，建议使用 HEPES；

　　根据需要，非必需。

　　3

　　L-谷氨酰胺（L-glutamine）

　　作用：L-谷氨酰胺是一种氨基酸，细胞的重要能量来源，参与蛋白质的合 成，也为合成核酸提供碳源。

　　存在的不足：

　　L-谷氨酰胺不稳定，在中性的水溶液中会自发降解；

　　降解产物氨对细胞有毒性；

　　对氨敏感的细胞（如广州干细胞和原代细胞等）或培养环境（高密度反应器， 无补料的长期培养）不推荐含 L-谷氨酰胺的培养基。

　　解决方案：

　　选择不含谷氨酰胺的培养基，在使用前再添加 L-谷氨酰胺，并尽快用完；

　　选择稳定的谷氨酰胺替代物，如 glutaGRO?。

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