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最重要的AU标记广州抗体方法你清晰吗?

时间:2021-1-3 3:00:00  来源:http://gz.saiboerbio.com/news533884.html

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最重要的AU广州标记抗体方法你清晰吗?


1.琥铂酰酯 (NHS)


当运用荧光染料标记时,一般可购买内配有NHS琥铂酰酯(也称作琥铂酰亚胺酯)的活性标记物。在适当规范下,活性的染剂可与抗体分子体现(抗体分子一般含有多了赖氨酸基团)而造成结合物。过少的活性染料可依据各种各样方法祛除(一般采用过柱层析),接着AU广州标记抗体可应用于人体免疫系统分析。


2.异(基)双功效实验试剂 (Heterobifunctional reagents)


当AU标记抗体的标记物为蛋白分子(如辣根乳酸脱氢酶HRP、碱性磷酸酶AP或藻红蛋白PE)时,由于抗体和标记分子具有很多胺,因此抗体标记流程稍稍复杂。在这里类情况下,一般务必对在这其中一个分子(抗体)的一些赖氨酸进行装饰设计,因此铸就一个新的体现基团(X),而AU标记抗体的标记物上的赖氨酸作为另一个体现基团(Y)。当抗体与标记物混和时,应用双功效实验试剂导进Y基团,伴随着与X基团造成体现,从而造成异二聚体结合物(即标记抗体)。相关双功效实验试剂标记抗体或其他微生物菌种分子的应用,您可以在数百篇论文参考文献报道中找寻相关例证。


3.碳二亚胺(Carbodiimides)


这类实验试剂(EDC为广泛的例证)在胺基和含羧基的分子间造成共价连接 。Carbodiimides活性羧基,活性的化工中间体然后被胺基(由抗体分子的赖氨酸提供)吸咐。Carbodiimides一般用于连接 抗体和羧化的顆粒(如天然乳胶床垫顆粒、磁珠),以及其他羧化的表面如微孔板或解决处理芯片表面。Carbodiimides很少用于将染剂或蛋白标记物偶联反应到AU标记抗体上。


4.高碘酸钠(Sodium periodate)


这类物质对于绝大多数的标记物都是不宜的,但对于HRP标记却十分重要。高碘(Periodate)活性辣根乳酸脱氢酶分子的糖链,从而造成醛基,后边一种可与AU标记抗体分子上的赖氨酸体现。由于HRP分子本身含有非常少的赖氨酸,因而相对很容易获得 抗体-HRP结合物,且无明显的HRP多聚化造成。


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