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最主要的广州AU标记抗体方法你知道吗

时间:2020-4-22 3:00:00  来源:http://gz.saiboerbio.com/news356266.html

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1.琥珀酰酯 (NHS)

当使用荧光染料标记时,通常可购买内配有NHS琥珀酰酯(也称为琥珀酰亚胺酯)的活化标记物。在适当条件下,活化的染料可与广州抗体分子反应(抗体分子通常含有多了赖氨酸基团)而形成结合物。过量的活性染料可通过多种方法去掉(通常采用过柱层析),然后AU广州标记抗体可应用于免疫分析。

2.异(基)双功能试剂 (Heterobifunctional reagents)

当AU广州标记抗体的标记物为蛋白分子(如辣根过氧化物酶HRP、碱性磷酸酶AP或藻红蛋白PE)时,由于抗体和标记分子具有多个胺,因此抗体标记流程略为复杂。在这种情况下,通常需要对其中一个分子(抗体)的一些赖氨酸进行修饰,以此创造一个新的反应基团(X),而AU标记抗体的标记物上的赖氨酸作为另一个反应基团(Y)。当抗体与标记物混合时,利用双功能试剂引入Y基团,随之与X基团发生反应,从而形成异二聚体结合物(即标记抗体)。关于双功能试剂标记抗体或其他生物分子的应用,您可以在数百篇文献报道中找到相关例子。

3.碳二亚胺(Carbodiimides)

这类试剂(EDC为常见的例子)在胺基和含羧基的分子间形成共价连接。Carbodiimides活化羧基,活化的中间体随后被胺基(由抗体分子的赖氨酸提供)吸附。Carbodiimides通常用于连接抗体和羧化的颗粒(如乳胶颗粒、磁珠),以及其他羧化的表面如微孔板或芯片表面。Carbodiimides很少用于将染料或蛋白标记物偶联到AU标记抗体上。

4.高碘酸钠(Sodium periodate)

这种化学物质对于绝大多数的标记物都是不适用的,但对于HRP标记却十分重要。高碘(Periodate)活化辣根过氧化物酶分子的糖链,从而形成醛基,后者可与AU标记抗体分子上的赖氨酸反应。由于HRP分子本身含有非常少的赖氨酸,因而相对容易获得抗体-HRP结合物,且无明显的HRP多聚化发生。

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